Экспресс-анализ в пищевой промышленности

Приборы и реагенты для ПЦР в полевых условиях

Принцип метода

Принцип метода изотермической амплификации

12В основе изотермической амплификации (ПЦР) могут лежать 2 основных метода LAMP (Loop-mediated isothermal amplification) и SDA (Strand Displacement Amplification). Эти методы имеют множество вариаций  - разное количество используемых праймеров, различные ферменты, добавки. Все это направлено на увеличение специфичности и скорости реакции. И действительно - изотермическая амплификация является на настоящее время самой быстрой, кроме того, ферменты-полимеразы со сдвиговой активностью практически не восприимчивы к загрязнителям и ингибиторам, что дает возможность проводить реакцию непосредственно в лизированной пробе, без дополнительной очистки. 
В ходе реакции, при определенной температуре праймеры связываются с ДНК, полимераза достраивает вторую цепь ДНК. Принцип похож на обычную ПЦР, только отсутствует стадия денатурации. В место этого используется полимераза со сдвиговой активностью. Она "сбрасывает" находящуюся на15 ее пути цепь и таким образом получается за один проход 1-цепочечная ДНК и 2--х цепочечная ДНК, выстроенная полимеразой. 1-цепочечная ДНК доступна для отжига праймеров, цикл повторяется. В смеси также находится краситель, повышающий урвень флуоресценции при увеличении количества ДНК. Дизайн и синтез праймеров практически не отличается от процесса разработки обычных ПЦР-систем.

Преимущества:

- Скорость анализа. Самые быстрые методы анализа ДНК, доступные на рынке требуют нескольких часов работы высококвалифицированного персонала, чтобы завершить анализ. Наше решение позволяет провести полный анализ за 10-20 минут, при этом не нужно обладать какими-то особенными навыками, результат выдается автоматически в понятном виде;
- Не нужна лаборатория. Анализ можно проводить и вне лабораторий - на производстве, в поле. Особенных требований нет, единственное требование - температура окружающего воздуха должна быть близкой к комнатной.
14- Не требуется дополнительное дорогостоящее оборудование. Достаточно дополнительно приобрести дозатор 10-100 мкл (стоимость у разных производителей 50-100 долларов США), центрифугу (не обязательна), одноразовые наконечники для дозатора и одноразовые пробирки типа Эппендорф.
- Производство находится в России - это сильно сокращает время поставки приборов и реагентов к ним. Мы знаем полностью устройство приборов и процессы, происходящие в ходе реакции, что дает в кратчайшие сроки решить возникающие проблемы. 
- Возможность простой разработки тест-систем для изотермической амплификации, если имеется разработанная тест-система для обычной ПЦР